慢病毒载体是细胞和基因治疗的重要工具，可搭载外源正常基因导入靶细胞，以纠正或补偿缺陷和异常基因引起的疾病，实现治疗性蛋白的长期表达和组织特异性表达，无需药物干预、放疗或手术治疗，从根源上解决传统疗法存在的一系列问题。
 

本期极客对话，我们专访了药明生基慢病毒工艺开发极客喻笛。喻笛博士毕业于吉林大学生物化学与分子生物学专业，2021年加入药明生基，拿到高纯度高滴度的慢病毒载体是他的主要目标和工作内容。
 

作为药明康德2022年度Top20极小明，喻笛博士深度践行药明康德极文化并在慢病毒纯化回收率提升方面做出了突出贡献，并形成了自己的方法论，他把它表述成一个公式——效率=目标×能力×速度。以客户要求为目标，通过提升能力和速度，快速地保质保量地完成。
（备注：极客挑战赛是药明康德自2021年起发起的内部比赛，鼓励药明康德人在各自的专业赛道中比学赶超，用更优的方法挑战极限目标，加速新药研发进程，在赋能客户造福病患的同时也成长为更优秀的自己）

今天，让我们走进极客喻笛的故事

在追光的道路上

与光同行

以梦为马

不负韶华！
 

能力：Establish-Refine-Validate流程，打造稳健的平台工艺
 

“作为一家CTDMO 公司，效率是尤为重要的，如何提升效率需要我们不断地思考。就慢病毒工艺开发而言，目前大多数项目处于IND阶段，需要快速稳定的结果，平台化、流程化、稳健的工艺对提升效率尤为重要，稳健的平台工艺也是公司能力差异化的基准”，喻笛博士说道。
 

基于丰富的项目经验，喻笛博士对于打造稳定的平台工艺也有自己的方法论，即Establish-Refine-Validate流程。

1.Establish：搭建平台工艺的起始阶段通过大量总结汇总历史数据，找到一条可执行、可优化推进的工艺路线，再经过数据分析找到关键工艺步骤，发现问题根源，并通过调研文献，确定可行性方案；

2.Refine：对路线不断地打磨优化，这个过程需要大量的实验和扎实的数据支持，选择有代表性的检测方法也是重要环节；

3.Validate：可行的路线后最终要在生产规模上进行验证，确定工艺是否具有可放大性、稳定性，同时不断积累生产批次数据，进行统计分析，为以后的工艺优化打下基础，持续提升平台工艺。
 

速度：为客户争取时间和机会
 

由于IND项目时间的特殊性，如何缩短研发时间为客户争取时间和机会尤为重要，因此需要严格把控时间策略，对此喻笛博士也有独到的方法论：首先对任务的细致拆解，找到主线任务，在保证主线的情况下，尽可能压缩非关键步骤的时间，如细胞培养，可以考虑交替排班，多个批次实验并行。其次是多部门的沟通，对于工艺开发来说，检测尤为重要，我们往往会将检测样品的有限度进行排序，涉及到后续实验判断的结果会放在靠前的位置，保证整个流程顺利向前推进。

效率=目标×能力×速度Case Study
 

接下来喻笛博士为我们分享了2个项目案例：
 

# Case Study1

目标：降杂质

挑战：时间紧、同时交付三个慢病毒产品
 

“这个项目比较特殊，客户有三个目的基因（gene of interest，GOI），需要同时转导入受体细胞中，常规项目一个GOI的工艺开发时间一般为3-4个月（2 Demo+3 Veri），按照这个时间至少需要9-12月时间才能完成工艺开发，但客户希望在5-6个月内完成，在时间上有巨大的挑战”，喻笛博士说道。

 

且客户之前和其他的CDMO 公司合作时，使用的慢病毒生产工艺较陈旧，因而出现杂质太高的问题，IND 递交时被CDE 挑战。这是客户急需解决的问题。喻笛博士继续补充道。

 

如何开发合适的工艺保证开发时间和杂质同时满足客户需求呢？
 

喻笛博士及其团队成员和客户、内部其他部门进行了充分讨论，首先调整上游细胞培养策略大大减少开发时间。下游纯化工艺中，锁定关键节点结果，并提前针对可能出现的结果进行分析，给出不同的Option，有效节省项目执行时间。最终在药明生基和客户的共同努力下，仅4-5个月就完成了所有的工艺开发，且放大后结果超出客户的预期。同时，客户非常关心的杂质问题也得到了圆满解决，对比原工艺，药明生基优化后的工艺杂质含量显著降低：HCD降低30倍，HCP降低2倍，BSA残留降低833倍，质粒DNA残留降低7倍。目前药明生基也正在积极支持客户进行该项目IND 中美申报。
 

# Case Study2

目标：提产能、降成本

挑战：临床I期项目，需进行可比性研究，时间紧
 

这是一个已处于临床1期的项目，原有慢病毒生产工艺不稳定、回收率低、生产达不到目标，客户需要优化工艺以完成后续生产。谈到这个项目的挑战点，喻博说：“因为涉及到工艺变更，要求我们做到变更前后的质量可比，否则会给客户后续的实验带来巨大影响。比如我们在下游酶切和澄清步骤做了优化，可这一步骤上的改变属于中度变更，客户非常犹豫，考虑到客户的为难之处，我们通过查阅资料以及总结过往实验数据，从事实上说服客户做出改变” 。随着项目的不断推进，好的结果的出现一步步也赢得了客户的信任，最终仅 1 个月完成了工艺优化，且产量较原来提升 3-5 倍, 回收率平均提升 4 倍”。目前在生产规模上完成的生产批次与变更前的质量完全可比，有利支持了客户商业化进程的推进。

 

对于细胞和基因治疗研发企业来说，选择一家工艺稳定成熟的CDMO 公司可大大减少试错成本、沟通成本和时间成本。
 

关于药明生基
 

药明生基是药明康德旗下专注于细胞和基因疗法的CTDMO (Contract Testing, Development and Manufacturing Organization)，致力于加速和变革细胞和基因疗法及其他高端疗法的研究、开发、测试、生产和商业化。药明生基能够助力全球客户将更多创新疗法早日推向市场，造福病患。更多信息，请访问www.wuxiatu.com